以下是關(guān)于?植物海藻糖-6-磷酸(T6P)ELISA試劑盒說明書?的核心內(nèi)容整理：

　　BS-8050 植物海藻糖-6-磷酸(T6P)ELISA試劑盒 天津本生

　　實驗原理?

　　采用雙抗體夾心法(或一步夾心法)檢測T6P濃度：

　　包被抗體?：微孔板預(yù)包被T6P特異性抗體。

　　反應(yīng)體系?：依次加入樣本、標(biāo)準(zhǔn)品和HRP標(biāo)記檢測抗體，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物。

　　顯色與檢測?：TMB底物在HRP催化下顯色(藍(lán)色→黃色)，450nm波長測定OD值，濃度與吸光度正相關(guān)。

　　試劑盒組成?

　　組分 96孔配置(示例) 備注

　　微孔酶標(biāo)板 12孔×8條 預(yù)包被抗體

　　標(biāo)準(zhǔn)品 0.3mL×6管 濃度梯度：0-80 μg/L或0-12 ng/mL

　　HRP檢測抗體 6mL(或10mL) 需避光保存

　　TMB底物(A/B) 各6mL 現(xiàn)配現(xiàn)用

　　終止液 6mL(2M硫酸) 顯色終止

　　20×洗滌緩沖液 25mL 使用前1:20稀釋

　　樣本處理要求?

　　樣本類型?：植物組織勻漿、細(xì)胞上清液等，避免含疊氮鈉(HRP抑制劑)。

　　預(yù)處理?：1000×g離心20分鐘取上清，分裝后-20℃保存，避免反復(fù)凍融。

　　操作步驟?

　　平衡試劑?：使用前室溫平衡20分鐘，預(yù)冷組分需溶解。

　　加樣與孵育?：

　　標(biāo)準(zhǔn)品孔加入梯度濃度標(biāo)準(zhǔn)品，樣本孔加入待測液(建議復(fù)孔)。

　　37℃孵育60分鐘，洗板5次(手工或自動洗板機)。

　　顯色與終止?：

　　每孔加入TMB底物，避光反應(yīng)15分鐘。

　　加入終止液后15分鐘內(nèi)測定OD450值。

　　注意事項?

　　質(zhì)量控制?：S0標(biāo)準(zhǔn)品作為陰性對照，樣本濃度需乘以稀釋倍數(shù)。

　　保存條件?：未使用板條需密封保存于4℃，試劑盒有效期通常為6個月(2-8℃)。

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